HPLC高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等，它是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
HPLC高效液相色譜儀的儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，因此在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。
HPLC高效液相色譜器一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)（色譜柱）、檢測系統(tǒng)和數據處理與記錄系統(tǒng)組成，具體包括儲液器、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數據工作站等幾部分。其中輸液泵、色譜柱和檢測器是HPLC高效液相色譜儀的關鍵部分。
1、溶劑輸送系統(tǒng)
①儲液器：用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進入泵內。
②脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器，從而引起噪聲，不能正常檢測。
③輸液泵：將儲液器中的流動相連續(xù)不斷地以高壓形式進入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過程。
④梯度洗脫裝置：是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進樣系統(tǒng)
進樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進樣方式可以分為兩種：閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱：對樣品進行分離，是整個色譜系統(tǒng)的心臟，它的質量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統(tǒng)
檢測器：將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉變成易于測量的電信號，被數據系統(tǒng)接收，得到樣品分離的色譜圖。
5、數據處理和記錄系統(tǒng)
對色譜數據進行處理，并參與HPLC高效液相色譜儀器的自動控制。
